1.1 原料
實驗室自制果汁,并在室溫下開蓋放置36 h,果汁與空氣直接接觸,使果汁在自然環(huán)境條件下污染一 定濃度的雜菌.
1.2 培養(yǎng)基 普通營養(yǎng)培養(yǎng)基:胰蛋白胨 5 g,酵母浸粉 2.5 g,葡萄糖 1.0 g,瓊脂粉 15.0 g,pH 值 7.0,去離子水 1 000 mL,121 ℃滅菌30 min.
1.3 主要儀器與設(shè)備 YXQ-LS-70A型高壓滅菌鍋(上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);BGE-240型烘干箱;SW-CJ-2D型潔凈工作臺;LRH-70型生化培養(yǎng)箱.
1.4 含菌培養(yǎng)皿的準(zhǔn)備 本文采用直徑為9 cm的培養(yǎng)皿(表面積為3.14×4.52=63.585 cm2 ),按照平板菌落計數(shù)法測定自制果 汁中細(xì)菌污染情況,重復(fù)3次,取平均值.
然后吸取自制飲料1.0 mL均勻涂布至普通培養(yǎng)基上,涂布后的 含菌培養(yǎng)基上細(xì)菌分布密度可由公式(1)計算得到.
1.5 潔凈工作臺乙醇輔助紫外殺菌效果的確定 將21個含菌培養(yǎng)基分為7組,分別置于潔凈工作臺(操作空間為1150×500×500 mm)中,將培養(yǎng)皿蓋 打開,
然后開啟紫外燈(40 W)照射30 min,每隔5 min取出1組培養(yǎng)皿. 潔凈工作臺中均勻噴入10 mL 75%乙醇溶液,然后按照上述方法將開蓋的含菌培養(yǎng)基置于潔凈工作 臺中紫外燈照射30 min,
未經(jīng)紫外線照射的作為陰性對照,取出的培養(yǎng)皿于37 ℃條件下培養(yǎng)24 h,進(jìn)行 細(xì)菌總數(shù)計數(shù),取3次重復(fù)的平均值.
1.6 潔凈工作臺無菌環(huán)境維持時間的確定 將開蓋的含菌培養(yǎng)基置于潔凈工作臺中,采用乙醇輔助紫外線照射25 min,然后將紫外燈關(guān)閉,
培養(yǎng) 皿繼續(xù)置于潔凈工作臺中48 h,每隔12 h取出1組培養(yǎng)皿,置于37 ℃下培養(yǎng)24 h,進(jìn)行菌落計數(shù),每組3 個重復(fù),取平均值.